Научные статьи // Методы исследования
Метод определения эндонуклеаз рестрикции в колониях бактерий
- Категория: Методы исследования
- Просмотров: 5716
Прикладная биохимия и микробиология- 1988.- Т. 24, № 1. С. 121-124
Предложен метод тестирования бактериальных штаммов на наличие эндонуклеаз рестрикции. Анализ проводится непосредственно в клетках из колоний с чашки Петри. Собранные клетки обрабатывают лизоцимом и тритоном Х-100 и после центрифугирования супернатант анализируют на наличие специфической эндонуклеазной активности. Метод позволяет за 3—4 ч провести анализ до 100 колоний.
Читать полный текст статьи Метод определения эндонуклеаз рестрикции в колониях бактерий
Определение чистоты препаратов эндонуклеаз рестрикции
- Категория: Методы исследования
- Просмотров: 6683
Известия СО АН СССР, Серия биол. наук, №14, выпуск 2, 1988
В начале 70-х годов были открыты первые эндонуклеазы рестрикции (рестриктазы), а сегодня уже налажен выпуск широкого ассортимента этих ферментов для использования в генно-инженерных работах. Одной из важнейших характеристик производимых препаратов ферментов является их чистота от примесных активностей, в частности от примесей нуклеаз и фосфатаз.
Читать полный текст статьи Определение чистоты препаратов эндонуклеаз рестрикции
Расщепление ДНК, адсорбированной на поверхности фосфолипидных мембран, рестриктазами типа II
- Категория: Методы исследования
- Просмотров: 7049
Биохимия, Т. 51, вып. 9, 1986, С 1496 - 1498
Изучен гидролиз ДНК фага λ рестриктазами типа II в присутствии модельных мембран из яичного фосфатидилхолина. Показано, что степень гидролиза ДНК ферментами BspI, PstI и BamHI в этих условиях резко снижена. Это не связано с необратимой инактивацией ферментов или их взаимодействием с мембраной. Наиболее вероятное объяснение ингибирования гидролиза ДНК в присутствии фосфолипидных везикул - изменение субстратных свойств ДНК в результате ее адсорбции на поверхности фосфолипидной мембраны при участии ионов Mg2+.
Поиск штаммов-продуцентов эндонуклеаз рестрикции среди почвенных микроорганизмов
- Категория: Методы исследования
- Просмотров: 6888
Известия СО АН СССР, Серия биол. наук, выпуск 2, 1988, 109 - 113
Возникновение генетической Инженерии и ее успехи в значительной мере связаны с открытием эндонуклеаз рестрикции [1], Эти ферменты широко используются в решении прикладных задач и служат объектом фундаментальных исследований, касающихся белок-нуклеиновых взаимодействий [1—3]. Наряду с этим, актуальным является изучение биосинтеза рестриктаз [4].
Целью данной работы явилось выявление новых штаммов-продуцентов эндонуклеаз рестрикции среди почвенных микроорганизмов, а также оптимизация культивирования одного из них.
Подробнее: Поиск штаммов-продуцентов эндонуклеаз рестрикции среди почвенных микроорганизмов