GlaI-ПЦР-анализ в режиме реального времени регуляторных областей генов HDAC4, RARB and URB1 человека

Дубинин Е.В., Акишев А.Г., Абдурашитов А.А., Олейникова С.Б., Ситько В.Л., Дегтярев С.Х. 

RES J PHARM BIOL CHEM SCI Volume 7, Issue 2, 2016 (March - April)

GlaI-ПЦР-анализ в режиме реального времени (GlaI-РВ-ПЦР-анализ) разработан для определения статуса метилирования регуляторных областей генов HDAC4, URB1, RARB в препаратах ДНК из лейкоцитов человека. GlaI-РВ-ПЦР-анализ заключается в гидролизе ДНК метил-зависимой сайт-специфической ДНК эндонуклеазой GlaI с последующей ПЦР в реальном времени с праймеров, окаймляющих место гидролиза. Полученные данные подтверждают полное метилирование изученных сайтов ACGT и GCGC в регуляторных областях генов HDAC4 и URB1 и полный гидролиз этих сайтов эндонуклеазой GlaI. Первый экзон гена RARB слегка метилируется в препаратах ДНК из лейкоцитов человека и в соответствии с полученными данными GlaI-РВ-ПЦР-анализа мы делаем вывод об отсутствии гидролиза сайта ACGCG в гене RARB эндонуклеазой GlaI . Полученные данные соответствуют литературным. Предлагаемый способ GlaI-ПЦР-анализа в режиме реального времени может быть использован для определения статуса метилирования любых уникальных участков в геноме человека и млекопитающих.

Читайте полный текст статьи (на английском) на сайте Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences (pdf)